Что такое качественный анализ на гепатит C

Печень является жизненно важным органом организма и важно поддерживать ее здоровое состояние. Следует понимать, что такое гепатит. Это серьезное заболевание вирусной природы, которое поражает печень. В отличие от других болезней печени, которые могут возникать по вине человека (злоупотребление алкоголем, жареной пищей и пр.), гепатит передается от человека к человеку, и заболеть может каждый. Для обнаружения этой болезни существует несколько типов медицинских исследований. Один из таких тестов ПЦР качественный на гепатит С.

Типы исследований

ПЦР или полимеразная цепная реакция особый вид медицинского исследования, который направлен на поиск определенного типа РНК возбудителя заболевания. Гепатит С вызывается особым типов вируса, который содержит молекулу рибонуклеиновой кислоты (РНК). РНК гепатита находится в крови больного, после заражения. С помощью полимеразной цепной реакции проводится поиск РНК вируса в биологическом материале человека. Для анализа используется венозная кровь.

Качественный и количественный анализ не проводятся одновременно, назначают один из двух типов исследования. Качественный тип обычно используется для быстрого скрининга или профилактического анализа. Качественное исследование подразумевает качественную оценку содержания инородных (вирусных) ДНК в крови человека. То есть результатом будет подтверждение наличия или отсутствия вируса в организме человека.

Количественный анализ на гепатит показывает, какое именно количество вируса обнаружено в исследуемом материале. От количества вредоносных микроорганизмов зависит установление стадии заболевания и степени поражения организма вирусом.

В результате анализа будет указана конкретная величина, которая позволяет определить, как развивалась болезнь и даже возможное время заражения.

Кроме упомянутых типов анализов может проводиться генотипирование вируса. Этот вид исследования направлен на определение точного генного типа вируса. Всего медицина знает 11 генотипов вирусного гепатита типа С, которые в свою очередь делятся на отдельные подвиды. Генотипирование позволяет идентифицировтаь вирус и подобрать наиболее эффективное лечение на основе особых свойств вируса и препаратов. Также определение типа вируса помогает найти ответ на вопрос о географичесом распространении именно этого вида заболевания и проследит пути заражения.

Когда назначается анализ

Анализ ПЦР на гепатит является одним из наиболее точных диагностических методов лабораторных исследований. Качественный тип исследования назначается в первую очередь, дополнительные исследования или повторный анализ назначается только после получения положительного результата анализа. Исследование назначается в следующих случаях:

  • По желанию пациента. Любой человек может провериться на наличие заболеваний, обратившись к врачу. Коммерческая лаборатория проведет платное исследование, а врач расшифрует результаты.
  • При постановке на учет беременных или при планировании зачатия желательно сдать анализа на тяжелые вирусные заболевания, в том числе гепатит.
  • После контакта с больным, следует обязательно сдать соответсвубщие анализы.
  • После посещения стран с антисанитарными условиями врачи рекомендуют пойти медосмотр. Попадание фекальных масс в воду прямой путь к заражению гепатитом и другими тяжелыми заболеваниями.
  • Если в садике или школе, в который учится ребенок обнаружен гепатит С, необходимо проконсультироваться с врачом и, возможно, пройти обследование.

Анализ крови на гепатит может проводиться для скрининговых исследований и предотвращения эпидемий. Такие тесты проводятся в определенных географических зонах, где были обнаружены вспышки гепатита С (населенные пункты, районы города и пр.), места социального скопления людей (работники одной организации, учебные заведения и пр.).

Результаты

Качественный анализ на гепатит, хоть и отличается высокой точностью, дает немного полезной информации в случае обнаружения вируса. Однозначно по бланку с положительным результатом можно сказать одно: РНК вируса гепатита обнаружено в исследуемом биологическом материале. Но качественный анализ не может объяснить присутствие вируса. Могут быть следующие возможные объяснения при получении положительного результата:

  • Человек болен вирусом гепатита типа С (наиболее вероятный вариант). В этом случае проводится дополнительный количественный анализ для определения степени развития заболевания. Это необходимо, чтобы составить план лечения и подобрать наиболее эффективный курс терапии.
  • В некоторых случаях ПЦР реакция реагирует на вирусы гепатита других типов за счет перекрестного реагирования.
  • Приблизительно в 5% случаев положительный результат анализа является ложным по причине влияния человеческого фактора. Возможно загрязнение или неправильное хранение биологического образца, ошибки при взятии крови из вены и пр.

Если результат исследования на гепатит C отрицательный, это значит, что искомого РНК вируса не было найдено в биологическом образце. Также возможны случаи получения ложноотрицательных результатов анализа. Такая возможность должна определяться лечащим врачом. Иногда, содержание РНК вируса слишком незначительно в полученном образце, и ПЦР не может ее присутствие. Подобные случаи встречаются редко. При этом проводится повторный анализ.

Вызвать ложный положительный результат анализа ПЦР на гепатит типа С может загрязнение образца, нарушение правил транспортировки биологической жидкости. Также прием гепарина, который используется для разжижения крови, искажает результат. Некоторые другие химические вещества могут блокировать ферменты ПЦР. Поэтому обо всех принимаемым препаратах следует сообщать лечащему врачу.

Особенности теста

Исследование проводится в лаборатории, специально оборудованной для проведения этого типа анализа. Для ПЦР качественного на гепатит С сдается образец крови из вены. Тест на гепатит С расшифровка которого будет проводиться лечащим врачом, можно провести в частной коммерческой лаборатории по собственной инициативе.

Кроме исследования ПЦР, проводится также распространенный тип лабораторного исследования крови ИФА (иммуноферментный анализ). В случае расшифровки, эти два теста могут дать совершенно различный результат. Бывает, что ПЦР анализ положительный, а ИФА отрицательный.

Возможно, присутствует лабораторная ошибка, и один из результатов ложный, а может быть, оба теста проведены правильно и содержат правдивую информацию.

Иммуноферментный тест основывается на поиске и подсчете количества антител, которые вырабатывает человеческий организм в ответ на атаку вируса. В инкубационный период, когда вирус уже находится в организме, но еще не находится в процессе адаптации и не атакует клетки печени, вирус гепатита может быть не опознан иммунной системой человека. Поэтому антитела еще начали вырабатываться или их слишком мало, для того, чтобы лабораторный анализ их обнаружил.

Если результат ИФА теста положительный, а ПЦР анализ отрицательный, то метод полимеразной цепной реакции также точнее. ИФА отражает присутствие антител к вирусу, как ответа иммунной системы организма. Однако антитела к вирусу сохраняются всю жизнь, с момента заражения, и если человек переболел гепатитом в прошлом, анализ ИФА всегда будет положительным. При проведении теста ПЦР такая путаница исключена, так как ведется поиск вируса.

В результате анализа на гепатит С качественного, может быть обнаружено присутствие вируса в организме. Проведение анализа с помощью полимеразный цепной реакции подразумевает поиск ПЦР РНК вируса. Ведется поиск конкретного типа рибонуклеиновой кислоты. Проведенный тест ПЦР на гепатит С не отобразит присутствие других возбудителей болезней.

ПЦР — диагностика вируса гепатита С (количественно)

Исследование для выявления возбудителя гепатита C (HCV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени определяется наличие генетического материала (РНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

РНК HCV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций — это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя.

Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (HCV) — РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает печень. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и вызывать криоглобулинемию, болезнь Шегрена и В-клеточные лимфопролиферативные заболевания. HCV благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза развития заболевания и эффективности противовирусной терапии.

Основной путь передачи инфекции — через кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятно заражение при половом контакте и ребенка от матери во время родов, но это случается нечасто.

Острый вирусный гепатит, как правило, характеризуется бессимптомным течением и остается невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро — с тошнотой, ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса (редко сопровождается желтухой). У 60-85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Посредством ПЦР выявляют РНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита С и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки с учетом генотипа HCV позволяет контролировать проводимую терапию и прогнозировать течение болезни.

Длительность терапии и периодичность количественного определения РНК вируса гепатита С зависит от генотипа вируса и степени повреждения печени.

Для чего используется исследование?

  • Для подтверждения диагноза «вирусный гепатит С».
  • Для прогнозирования течения вирусного гепатита С.
  • Для мониторинга противовирусной терапии и решения вопроса о дальнейшей тактике лечения.

Что означают результаты?

  • Не обнаружено — РНК вируса гепатита С не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (200 копий/мл = 400 МЕ/мл).
  • 2*10^6 копий/мл (>4*10^6 МЕ/мл) — РНК вируса гепатита С обнаружена. Высокая виремия.
  • >1,0*10^8 копий/мл (>2*10^8 МЕ/мл) — РНК вируса гепатита С обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.
Смотрите так же:  Кашель и насморк гноем

Линейный диапазон концентраций РНК вируса гепатита С, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5*10^2 – 1,0*10^8 копий/мл (1,5*10^3 – 2*10^8 МЕ/мл).

  • Уровень вирусной нагрузки крови не указывает на степень повреждения печени и тяжесть заболевания. Для их оценки необходимо исследовать биохимические показатели и материалы биопсии.
  • При планировании лечения очень важно определить генотип вируса гепатита С.

ПЦР-диагностика гепатитов

Цены на ПЦР-диагностика гепатитов

  • ДНК HBV количественный тест в крови 1500 руб.
  • ДНК вируса гепатита В качественный тест в крови 500 руб.
  • Определение генотипа гепатита C (PHK HCV) в крови 1600 руб.
  • РНК HCV количественный тест в крови 2500 руб.
  • РНК вируса гепатита С качественный тест в крови 550 руб.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является одним из методов диагностики, позволяющих добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК/РНК) в биологическом материале (пробе) с использованием фермента ДНК-полимеразы.

По данным Всемирной организации здравоохранения, более 2 млрд. человек инфицированы вирусом гепатита В (HBV); число хронических носителей вируса достигает 400 млн. человек. Ежегодно в мире ВГВ инфицируется около 50 млн. человек, около 2 млн. из них умирают. Около 500 млн. лиц инфицированы вирусом гепатита С (HCV). Таким образом, на данный момент складывается достаточно неблагоприятная эпидемическая ситуация по инфекциям, вызывающим гепатит В и гепатит С.

В связи с этим актуальным является использование методов диагностики этих инфекций, которые должны удовлетворять следующим характеристикам:

— получение результатов анализа в максимально короткие сроки;

— высокие специфичность и чувствительность как предпосылки достоверности анализа.

ПЦР решает следующие задачи:

— диагностика инфекций на самых ранних стадиях заболевания (в период серонегативного окна);

— указывает на отсутствие вирусов в крови при неопределённых результатах иммуноферментных анализов;

— выявляет истинных вирусоносителей среди серопозитивных лиц;

— позволяет определить генотип вирусов гепатита С (1a,1b,2,3a/3b).

ПЦР позволяет определять в исследуемом материале (кровь, пунктат печени) ДНК вируса гепатита В или РНК вируса гепатита С как качественно, так и количественно.

Положительный анализ свидетельствует об остром или хроническом гепатите, отрицательный результат – об отсутствии инфекции.

  • При повышении в биохимическом анализе крови уровня АлАТ и АсАТ
  • Обследование на этапе подготовки к беременности или оперативному вмешательству
  • Обследование пациентов, которые часто подвергаются внутривенным инъекциям
  • При незащищённом половом контакте
  • Наркомания
  • При наличии признаков вирусного гепатита
  • Застой желчи (холестаз)

Для диагностики гепатитов используется метод ПЦР в режиме реального времени (Real-Time PCR) на анализаторе ДТ-96, реагенты фирмы «ДНК-технология».

Подготовка

Специальной подготовки к анализу не требуется. Рекомендуется воздержаться от приема пищи в течение 4 часов перед забором крови.

Исследование можно проводить через 2 недели после предполагаемого момента инфицирования, что дает возможность ранней диагностики заболевания.

Добрый день.
Хочу искренне и сердечно поблагодарить кардиохирурга ФНКЦ, Терещенко Василия Ивановича, за его благородную работу спасать жизни людей. Этот человек очень внимательный и заботливый к своим пациентам. Всегда выслушает и посоветует. И еще хочу поблагодарить мед. персонал кардиохирургического отделения за внимание к пациентам.
Гильметдинов Ш.Г.

Был сегодня на приёме у врача травматолога ортопеда Шибанов М. В. очень внимательный и чуткий врач, распознал мои проблемы , с голеностопом ног правой ноги. Назначил курс лечения дал хорошие рекомендации. А до этого ходил к другим врачам, работают по шаблону и не особо проникают в проблему. Спасибо что старая школа движет. Обращайтесь , умный доктор.

Самый лучший врач психиатор Горин Глеб Александрович

Выражаю благодарность замечательным врачам ФНКЦ ФМБА. Таким профессионалам не страшно доверить свою жизнь. Отдельное спасибо анастазеологу Светикову Сергею Николаевичу, прекрасный и очень душевный врач.

В мае 2018 года моей маме была сделана операция на сердце (шунтирование).
Уважаемый Александр Сергеевич!
Вы-врач от Бога!Низкий Вам поклон и просто человеческое СПАСИБО за Ваш высокий профессионализм и бесконечное внимание к своим пациентам.
Вы очень добрый человек! И такой молодой!Что может быть дороже маминого сердца?!
Благодарю весь коллектив отделения кардиохирургии!Огромное спасибо докторам Борисову .

Хочу выразить огромную благодарность Ванке Никите Сергеевичу. Очень чуткий и отзывчивый врач, настоящий профессионал своего дела. Спасибо огромное за понимание, внимательное отношение, за то, что в любой ситуации может поддержать и делом, и словом, и своим юмором.А также, хочу сказать отдельное спасибо Кагановской Лидии Михайловне, анестезиологу Никите Сергеевичу (к сожалению, не знаю его фамилию) и всему персоналу гинекологичес.

Дорогой доктор Сологубов Василий Владимирович, спасибо за жизнь!
Невозможно передать словами мое восхищение этим прекрасным человеком и врачом. После того как мне, в январе 2017 года, был поставлен диагноз, общение с врачами стало либо сочувствием с «обнадеживанием» на 2-3 месяца, либо нескрываемой раздраженностью, что больной с таким диагнозом и в таком возрасте отвлекает от работы.
Бог послал мне встречу с Васили.

Большая благодарность и огромное спасибо врачу-хирургу Злобину Александру Ивановичу и ординатору Антону Юрьевичу за грамотное лечение, внимательное и доброжелательное отношение к пациентам. Желаю вам не терять с годами эти качества, они очень нужны пациентам.

Хочу выразить бесконечно благодарна врачу ЗИНОВСКИЙ Михаил Вячеславович профессионального проведению операции по геморрой свищ трещины 25 сентября также хочу выражаю свое благодарна за проведение реабилитации после операции спасибо Михаил Вячеславович вы отлично врач вы единственный врач профессионального врач огромное спасибо и ваше близко уважением Хаким

Хочу выразить огромную благодарность Юлии Валериевне. После сложного перелома руки и операции, проведённой в центральной больнице г. Подольска в марте 2018г., кисть практически не работала, и никто не давал благоприятных прогнозов. Юлия Валериевна нашла причину и порекомендовала дальнейшее лечение. Мне было сложно поверить, что после операции в вашем центре, моя рука будет работать, как и прежде.
Огромное спасибо Юлии Валериевне з.

Анализ ПЦР на гепатит С

Для постановки диагноза «хронический вирусный гепатит С (ХВГС)» требуется комплексное обследование человека, которое включает клинические, лабораторные и инструментальные исследования. Важным с точки зрения диагностики для постановки правильного диагноза является метод ПЦР – полимеразная цепная реакция.

Что показывает этот анализ и зачем он нужен?

Этим лабораторным методом обнаруживают РНК вируса гепатита С в крови человека. Вместе с иммуноферментным анализом (ИФА) на антитела к вирусу, ПЦР используют для постановки диагноза ХВГС и генотипа его возбудителя. Это исследование является одним из новейших методов лабораторной диагностики. Его достоверность при ХВГС превышает 97%, что считается очень хорошим показателем для исследований.

Существует три ПЦР анализа крови при ХВГС: качественный, количественный и генотипирование вируса. Первое исследование (качественный анализ) на вирус обнаруживает его в крови, поэтому используется только для постановки диагноза.

Второе (количественное) исследование определяет степень вирусной нагрузки на организм, поэтому применяется для контроля эффективности терапии.

Третий ПЦР (генотипирование) уточняет диагноз, устанавливая генотип вируса, что очень важно для назначения правильного противовирусного лечения.

Суть методики полимеразной цепной реакции заключается в использовании ферментов, которые многократно размножают генетический материал возбудителя в биоматериале. В процессе такой репликации пробирку с кровью несколько раз подогревают и охлаждают до температуры, необходимой для ускорения ферментативной реакции. В результате этих манипуляций количество вирусного генома многократно увеличивается, что позволяет его выявить даже при минимальном количестве.

ПЦР диагностика имеет много преимуществ перед другими лабораторными исследованиями:

  • высокая чувствительность – 97-98%;
  • гарантированная аналитическая специфичность (выявляет именно тот возбудитель, который требуется найти, а не его родственный штамм);
  • быстрота проведения (требуется не более 2 суток для получения заключения).

Три вида ПЦР анализов

Качественный ПЦР анализ назначается всем пациентам, у кого ИФА-анализом были выявлены антитела к вирусу ХВГС. После проведения качественного ПЦР может быть получено два варианта ответа: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено». Чтобы обнаружить в крови минимальное количество вируса, необходимы тест-системы с чувствительностью не менее 50 МЕ/мл. Если концентрация вируса в крови больного будет меньше, чем может определить диагностикум, то результат исследования может быть и ложноотрицательным. Чтобы избежать такой диагностической ошибки, лаборатории, осуществляющие ПЦР-диагностику, должны быть обеспечены высокочувствительными тест-системами. В лаборатории «Инвитро», к примеру, используются тесты с чувствительностью от 15 МЕ/мл. Информацию о чувствительности тестов работники лаборатории обязаны предоставлять пациентам и врачам по их первому требованию.

Количественный анализ ПЦР определяет степень виремии, то есть концентрацию возбудителя в крови, вирусную нагрузку. Результат этого исследования, в отличие от качественного ПЦР, выражается цифрами, например, 2×10*6 МЕ/мл, что означает 2 миллиона международных единиц в 1 мл крови. Часть лабораторий применяет другой показатель – число копий/мл. Эти два показателя легко конвертировать: 1 международная единица равна 4 копиям РНК. Таким образом, 2×10*6 МЕ/мл будет означать, что в крови больного обнаружено 8×10*6 копий вирусной РНК в 1 мл, т.е. 8 млн. копий в 1мл крови.

Генотипирование – это определение одного из шести генотипов вируса. От генотипа возбудителя зависит клиническая картина, скорость развития осложнений со стороны печени и прогноз для дальнейшей жизни пациента. Генотип вируса очень важен уже на стадии постановки диагноза, поскольку от его правильного определения зависит комбинация препаратов и длительность терапевтического курса, который будет назначен больному.

Однако даже такое казалось бы «идеальное» лабораторное исследование имеет свои минусы:

  • в ходе исследования происходит репликация генетического материала всех возбудителей, даже неживых, что может исказить результат. Поэтому для осуществления контроля эффективности с помощью ПЦР повторный анализ проводят не ранее, чем через 2 месяца после предыдущего, чтобы погибшие вирусы успели «покинуть» организм больного;
  • часть вирусного генома, который определяют с помощью тест-систем, теоретически может присутствовать и в других вирусах или микроорганизмах, поэтому есть вероятность ложноположительного ответа;
  • вирусы быстро мутируют. Иногда скорость и степень мутирования вируса настолько высока, что тест-система перестает улавливать их геном. Как следствие, возможен ложноотрицательный результат.

Для нивелирования этих недостатков, производители лабораторных тест-систем для ПЦР диагностики постоянно проводят их испытания, в том числе на перекрестные реакции и на чувствительность к тому или иному генотипу вируса.

Смотрите так же:  Титры антител гепатита в

Как сдавать анализ ПЦР на гепатит С?

Чтобы заключение обследования методом ПЦР были достоверными, необходимо строго соблюдать правила подготовки к его проведению:

  • исследование проводится на голодный желудок (глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь из пищи, могут повлиять на скорость и качество ферментной реакции);
  • разрыв между последним приемом пищи и отбором крови для анализа должен составлять не менее 8 часов;
  • накануне исследования запрещено принимать алкоголь и употреблять жирную пищу, период выведения которых затяжной;
  • за сутки до похода в лабораторию следует избегать сильных физических и эмоциональных нагрузок;
  • до момента забора крови не рекомендуется курить.

Чтобы избежать появления ложных заключений, предполагаемому больному необходимо прийти в лабораторию немного раньше, чем будет проведен забор крови. Нужно 15-20 минут для того, чтобы человек отдышался, успокоился. Адреналин, присутствующий в крови после быстрой ходьбы, может повлиять на результат обследования.

Если направляемый на анализ пациент принимает какие-либо лекарственные препараты, об этом он должен уведомить врача. Вполне возможно, что от приема некоторых из них придется на некоторое время отказаться (если это возможно).

Результат анализа ПЦР на гепатит С

Расшифровкой результатов занимается врач-лаборант той лаборатории, которая проводила анализ. Расшифровка – это определение отклонения полученного результата от нормы. Норма показателей устанавливается непосредственно производителем тест-системы, которая используется лабораторией для диагностики. Поэтому не стоит удивляться, что в одних лабораториях вирусную нагрузку определяют в МЕ/мл, а в других – в копиях/мл.

Получив заключение, его нужно уметь правильно трактовать. Трактовкой результатов исследования должен заниматься лечащий врач больного гепатитом С. Только после объективного, инструментального и лабораторного обследования пациента, врач может получить достаточное количество данных для грамотной трактовки полученных результатов ПЦР.

Оценка качественного анализа, как правило, не вызывает затруднений, даже у пациентов. Результат там может быть только один: «обнаружен» или «не обнаружен». При этом второй из них является нормой.

Показатели количественного анализа трактовать сложнее. Он показывает степень вирусной нагрузки на пациента. Даже среди гепатологов нет единого мнения по поводу того, как трактовать обнаруженную виремию. Большинство врачей склоняются к тому, что высокой нужно считать нагрузку более 8×10*5 МЕ/мл. Очень высокой считается нагрузка более 1×10*7 МЕ/мл, а низкой – менее 4×10*5 МЕ/мл.

Степень вирусной нагрузки говорит о вирулентности (агрессивности) вируса: чем больше его количество в крови, тем быстрее могут развиваться осложнения со стороны печени. Высокая концентрация вируса в крови беременной женщины повышает вероятность его проникновения через гематоплацентарный барьер к плоду. Виремия также влияет на эффективность лечения: при низких цифрах результативность терапии выше, чем при высоких.

Для того, чтобы быть уверенным в достоверности проведенного анализа ПЦР на гепатит С, нужно отдавать предпочтение только тем лабораториям, которые хорошо себя зарекомендовали. Ценовая политика при этом не должна играть первостепенную роль.

Вирус гепатита С (качественный + количественный) (ПЦР)

Где проводится: Тонус

Срок выполнения: 5 рабочих дней

+ Забор материала 200 руб.

+ Забор анализа на дому (только Нижний Новгород) 200 руб.

ПЦР диагностика вируса гепатита С – это молекулярно-генетическое исследование, которое позволяет не только быстро и точно подтвердить диагноз (качественный анализ), но, также отслеживать концентрацию вируса в крови пациентов (количественный анализ).

Гепатит С – серьезное заболевание, при котором, вирус тропен к гепатоцитам (клеткам печени), в следствие чего именно этот орган и поражается. Инфицирование вирусом гепатита С может привести к бессимптомному вирусоносительству, острой инфекции, либо к хронизации процесса (наиболее неблагоприятный прогноз).

Большое значение в своевременной диагностике гепатита С и лечении играет то, что при длительном процессе инфекция может приводить к развитию цирроза печени, ее недостаточности, а также, раку печени (гепатокарцинома). В связи с этим, быстрая и точная диагностика наличия вируса гепатита С в крови пациентов (сдать анализ на вирус гепатита С) оправдана и обязательна.

Качественный анализ – подтверждение инфицирования вирусом гепатита с намного эффективнее серологических исследований, так как определить генетический материал вируса с помощью ПЦР в режиме реального времени можно уже через 1-2 недели после заражения (задолго до появления специфических иммуноглобулинов). Метод основан на выявлении фрагментов РНК вируса различных генотипов (выделяют генотипа с 1 по 6: 1a, 1b, 2a. 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6). Тест достаточно чувствителен и специфичен, чтобы считать его одним из основных в диагностике инфицирования вирусом гепатита с.

Еще одним пунктом в диагностике заражения вирусом гепатита С является вирусная нагрузка. Это количественный метод определения вирусных частиц в сыворотке крови, также методом ПЦР. Определение вирусной нагрузки позволяет не только диагностировать, например, переход в хроническую стадию инфекции, но и контролировать эффективность проводимой противовирусной терапии. Так, снижение концентрации РНК на 85% и более через 3 дня от начала терапии говорит о благоприятном прогнозе для пациента.

Чтобы сдать анализ на вирус гепатита С не требуется специальной подготовки.

  • При наличии клинических признаков гепатита (увеличение печени, желтуха, повышение печеночных ферментов в биохимическом анализе крови)
  • Для профилактического обследования пациентов (качественный метод оценки является скрининговым, например, перед оперативным вмешательством, либо при ежегодном медицинском осмотре)
  • Метод ПЦР диагностики вируса гепатита С подходит для обследования контактных лиц, имеющих риск возникновения заболевания
  • При наличии гепатита смешанной этиологии, по активности вируса (вирусной нагрузке) можно определить ведущий вирус
  • При наличии хронического инфицирования вирусом гепатита С – для выявления фазы активности вируса (стадии активной репликации)
  • Для контроля эффективности противовирусной терапии
  • При циррозе печени (поиск причины, которая привела к данному исходу)

Качественный анализ дает результаты:

  • «Обнаружено» — при наличии РНК вируса гепатита С в сыворотке крови пациента
  • «не Обнаружено» — РНК вируса гепатита С не найдена, инфицирование не подтверждено

В основе количественного анализа на вирус гепатита С лежит определение вирусной нагрузки (концентрация РНК в образце):

  • «не обнаружено» — РНК вируса гепатита С не выявлена
  • Менее 15 МЕ/мл – РНК вируса гепатита С определена в значениях, ниже предела количественного определения. В этом случае результат необходимо обязательно сопоставлять с клинической картиной и по возможности повторить анализ
  • От 15 до 100000000 МЕ/мл – РНК вируса гепатита С обнаружена в диапазоне диагностических значений. Данный результат является подтверждением наличия инфекции
  • Более 100000000 МЕ/мл – РНК вируса гепатита С обнаружена, в концентрации, превышающей диагностические значения. К этому результату стоит отнестись с вниманием, при необходимости повторить.

В любом случае, анализ необходимо сравнивать с клинической картиной и подкреплять диагностический поиск всеми возможными дополнительными исследованиями. Таким образом возможно получение наиболее достоверного результата и правильного диагноза, а значит, и назначение эффективного лечения.

HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]

Исследование для выявления возбудителя гепатита C (HCV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (РНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

РНК HCV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций РНК HCV, определяемых тест-системой: 150-1*10^8 МЕ/мл.

Синонимы русские

Вирус гепатита С (ВГС), количественное определение РНК.

Синонимы английские

Hepatitis C Virus RNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood, HCV Viral Load, Hepatitis C Virus RNA Quant.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (HCV) – РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает печень. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и вызывать криоглобулинемию, болезнь Шегрена и В-клеточные лимфопролиферативные заболевания. HCV благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза развития заболевания и эффективности противовирусной терапии.

Основной путь передачи инфекции – через кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятно заражение при половом контакте и ребенка от матери во время родов, но это случается нечасто.

Острый вирусный гепатит, как правило, характеризуется бессимптомным течением и остается невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро – с тошнотой, ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса (редко сопровождается желтухой). У 60-85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. Хронический вирусный гепатит С протекает с повышением печеночных ферментов и скудным проявлением симптомов. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Выявление РНК HCV свидетельствует о размножении вируса в организме и является методом диагностики заболевания. Генетический материал вируса можно обнаружить с помощью ПЦР через 10-12 дней после инфицирования – в этот период специфические антитела, которые образуются через несколько месяцев после заражения, отсутствуют и биохимические показатели функции печени находятся в пределах референсных значений.

Посредством ПЦР выявляют РНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита С и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки с учетом генотипа HCV позволяет контролировать проводимую терапию и прогнозировать течение болезни.

Эффективность лечения оценивается по количеству РНК до и во время терапии. Обычно вирусная нагрузка крови снижается в несколько раз за первые три месяца успешного лечения. При эффективной терапии виремия уменьшается на два порядка в первые 4-12 недель лечения и после окончания курса терапии генетический материал вируса в крови не обнаруживается. Отсутствие снижения виремии через 12 недель с начала лечения указывает на его неэффективность. Рекомендовано проводить анализ до начала терапии, на 4-й, 12-й и 24-й неделях лечения и через 24 недели после окончания курса. Длительность терапии и периодичность количественного определения РНК вируса гепатита С зависит от генотипа вируса и степени повреждения печени.

Смотрите так же:  Первые симптомы трихомониаз

Для чего используется исследование?

  • Для подтверждения диагноза «вирусный гепатит С».
  • Для прогнозирования течения вирусного гепатита С.
  • Для мониторинга противовирусной терапии и решения вопроса о дальнейшей тактике лечения.

Когда назначается исследование?

  • При качественном обнаружении РНК вируса гепатита С.
  • При остром и хроническом вирусном гепатите С.
  • При микст-гепатитах.
  • При планировании, во время и после окончания противовирусной терапии.

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено.

  • Не обнаружено – РНК вируса гепатита С не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (50 МЕ/мл).
  • От 150 до 3*10^4 МЕ/мл – РНК вируса гепатита С обнаружена. Низкая виремия (наиболее благоприятный прогноз течения заболевания и эффективности терапии).
  • От 3*10^4 до 8*10^5 МЕ/мл – РНК вируса гепатита С обнаружена. Средняя виремия.
  • Свыше 8*10^5 МЕ/мл – РНК вируса гепатита С обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.

Линейный диапазон концентраций РНК вируса гепатита С, определяемых тест-системой, составляет 150-1*10^8 МЕ/мл.

Что может влиять на результат?

Недостоверный результат может быть получен при:

  • загрязнении биоматериала;
  • наличии в образце ингибиторов – химических и белковых субстанций, влияющих на различные компоненты ПЦР;
  • присутствии в крови гепарина.



Важные замечания

  • Уровень вирусной нагрузки крови не указывает на степень повреждения печени и тяжесть заболевания. Для их оценки необходимо исследовать биохимические показатели и материалы биопсии.
  • При планировании лечения очень важно определить генотип вируса гепатита С.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Литература

  • Возианова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. — К.: Здоровье, 2000. – Т.1.: 600-690.
  • Кишкун А.А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике. — М.:ООО МИА, 2006. – 471-476 с.
  • Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16 th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F, and others. In vivo tropism of hepatitis C virus genomic sequences in hematopoietic cells: influence of viral load, viral genotype, and cell phenotype. Blood. 1998 May 15;91(10):3841-9.PMID:9573022.
  • Revie D, Salahuddin SZ. Human cell types important for hepatitis C virus replication in vivo and in vitro: old assertions and current evidence. Virol J. 2011 Jul 11;8:346. doi: 10.1186/1743-422X-8-346. PMID:21745397.

Качественный и количественный анализ ПЦР на гепатит С: отрицательный, положительный, расшифровка

Гепатит С — вирусное заболевание печени, вызываемое флавивирусом HCV (от англ. hepatitis C virus), в структуре которого содержится молекула рибонуклеиновой кислоты (РНК). РНК несет генетический код вируса. Ее наличие позволяет проводить анализ ПЦР на гепатит С.

Опасность HCV для человека заключается и в том, что так называемое серологическое окно (промежуток времени между заражением и появлением реакции со стороны иммунной системы) может быть достаточно длительным — от нескольких недель до шести месяцев.

Это не дает обнаружить инфицирование и начать лечение вовремя.

В зависимости от индивидуальных особенностей организма носителя HCV может проявляться в острой форме, а также протекать как хроническое заболевание, которое потребует длительного и дорогостоящего лечения. При выявлении антител к HCV проводится ряд лабораторных анализов, в том числе ПЦР на гепатит С. Этот тест делается всем людям, в чьей крови были найдены антитела к HCV.

Что такое анализ ПЦР?

Лабораторный анализ ПЦР на гепатит С — исследование биологического материала с целью выявить наличие флававируса.

Полимеразная цепная реакция (так расшифровывается аббревиатура) показывает количественное значение вирусного поражения организма, его качественные характеристики, а также генотип вируса, содержащего РНК.

На их основе, а также на базе дополнительных анализов определяется способ и длительность терапии, а также эпидемиологический фактор (степень риска передачи другому носителю).

Что такое РНК-анализ на гепатит С?

ПЦР гепатита С еще называют РНК-анализом (HCV RNA), т.к. флававирус содержит в себе частицу РНК размером вириона 30-60 нм. Одной из особенностей этого микроорганизма является высокая склонность к мутациям.

Каждый из подвидов (генотипов) вируса имеет различную резистентность, что обуславливает разные методики лечения и характер дальнейшего прогноза для пациента.

Биологический материал (венозная кровь) сдается натощак и, как правило, тестируется методом Real-Time PCR (высокочувствительной диагностики в режиме реального времени с нижним лимитом определения 15 МЕ/мл с применением закрытых автоматизированных систем).

Существуют другие тесты, например COBAS AMPLICOR с сенситивностью 50-100 МЕ/мл. Для любого лабораторного исследования важен порог чувствительности, т.е. способности реагента выявить минимальную концентрацию вируса в биологическом материале.

Виды анализа на гепатит С методом ПЦР

ПЦР на гепатит С включает в себя три важных составляющих:

  • качественный анализ;
  • количественный анализ;
  • генотипирование.

Эти тесты позволяют определить характер виремии, а также генетические признаки возбудителя. В зависимости от чувствительности диагностической системы, исследование проводится один раз, и иногда для подтверждения или уточнения результатов делается повторный тест с более чувствительным реагентом.

Качественный ПЦР гепатита С

Анализ ПЦР на гепатит С качественный — это другое общее название анализа полимеразной цепной реакции. Стандартная чувствительность теста, позволяющего выявить наличие вирусного поражения, находится в пределах 10-500 МЕ/мл.

Негативный анализ ПЦР на гепатит С показывает, что концентрация вируса в крови пациента находится ниже порога восприимчивости диагностической системы.

Если качественный ПЦР дал ответ «не обнаружено», то для последующего лечения важно узнать порог чувствительности реагента.

Белковые фракции к флававирусу появляются значительно позже.

Количественный ПЦР гепатита С

ПЦР гепатит С количественный — это показатель вирусной нагрузки, который отображает уровень концентрации РНК флававируса в организме. Это показатель, отображающий, сколько фрагментов вирусной РНК содержится на один кубический сантиметр крови. Результаты ПЦР РНК гепатита С количественного теста в общепринятой системе обозначаются в международных единицах на миллилитр (МЕ/мл) и могут записываться разными способами, например — 1,7 млн или 1.700.000 МЕ/мл.

Количественная ПЦР диагностика гепатита С назначается пациентам перед началом противовирусной терапии, и на 12 неделе лечения, чтобы оценить результаты выбранного метода борьбы с HCV. Вирусная нагрузка позволяет определить три важных показателя заболевания:

  • инфекционность, т.е. степень риска передачи вируса от одного носителя к другому (чем выше концентрация РНК флававируса, тем выше вероятность заразить другого человека, например, при половом контакте);
  • метод и эффективность лечения;
  • длительность и прогноз противовирусной терапии (чем выше вирусная нагрузка, тем дольше длится лечение).

Количественная ПЦР диагностика гепатита С зависит от типа лабораторного теста и порога его чувствительности. Нижней границей нормы принято считать показатель до 600.000 МЕ/мл, среднее значение находится в пределах 600.000-700.000 МЕ/мл. Результаты от 800.000 МЕ/мл и выше считаются высоким уровнем концентрации РНК-содержащего вируса.

Генотипирование

Ввиду высокой мутационной активности HCV в природе при тестировании важно выявить, какой именно генотип вируса находится в крови пациента. Всего на планете зафиксировано 11 генотипов вируса гепатита С, в которые входят множество подвидов (субтипов). На территории РФ распространены 1,2 и 3.

ПЦР РНК гепатита С вместе с генотипированием — очень важная составляющая анализа, т.к. позволяет врачу определить резистентность (устойчивость) вируса, подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения.

Генотипирование также позволяет и косвенно определить состояние печени. Например, 3 генотип HCV нередко сопровождается стеатозом, при котором в клетках органа накапливается жир.

Анализ крови на ПЦР при гепатите С должен выдать цифру, определяющую генотип. В лабораторных ответах может быть написано «не типируется» — и это значит, что в крови человека находится вирус, не определяемый тестовой системой. Это может говорить о том, что генотип нехарактерен для данной географической зоны. В этом случае следует повторно сдать анализ с более высокой чувствительностью системы диагностирования.

Расшифровка анализа ПЦР на гепатит С

Тест на гепатит С ПЦР количественный расшифровать можно на основе приведенных выше данных. При получении результатов лабораторных анализов обычно пишутся следующие данные:

  • «найдено»/ «не найдено» (ПЦР качественный на гепатит С);
  • количество РНК-содержащих фракций, например 831.680 ME/мл (анализ на ПЦР количественный);
  • цифра, определяющая генотип HCV, например — 1, 2, 3, 4;
  • название теста — чаще всего Real-time.

Наиболее важным при расшифровке анализа ПЦР на гепатит С считается второй пункт, который показывает вирусную нагрузку, определяющую прогноз, способ и длительность лечения.

Если ПЦР анализ на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный — что это значит?

Для расшифровки лабораторных анализов важно обратиться к гепатологу или инфекционисту, который разъяснит полученную информацию в соответствии с видом диагностической системы и порогом ее чувствительности. В медицинской практике существует множество данных анализов крови, которые могут ввести человека без медицинского образования в заблуждение.

Например, если тест на гепатит С ПЦР отрицательный, а ИФА положительный, то может обозначать, что в данный момент в крови пациента нет HCV, но ранее он перенес острую форму гепатита С. Принято считать, что позитивный иммуноферментный анализ (ИФА) показывает, что в крови есть антитела, выработанные после вторжения вируса в прошлом. Но в современной медицинской практике ИФА анализ считается недостаточно надежным и нередко дает нетипичные результаты, поэтому врачи используют его в качестве первичного скрининга. При диагностике заболевания специалисты ориентируются именно на ПЦР тесты.

Полезное видео

В следующем видео очень подробно и интересно рассказывается, в чем суть метода ПЦР, как проводится анализ:

Заключение

Для анализа на ПЦР гепатита С обычно берется венозная кровь. Чаще всего происходит двойной забор биологического материала — для ИФА, и непосредственно для ПЦР теста. Для корректных результатов тестов требуется соблюдение основных правил лабораторного забора биологического материала:

  • кровь на анализ сдается в первой половине дня натощак;
  • между приемом пищи и забором крови должно пройти не менее 8 часов;
  • перед сдачей анализа нужно также исключить алкоголь и жареную пищу;
  • в течение суток перед сдачей крови необходимо избегать высоких физических нагрузок.

Результаты тестирования крови обычно готовы на следующий день.